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KALANG载脂蛋白A4(APOA4)多克隆抗体

KALANG载脂蛋白A4(APOA4)多克隆抗体

  • 简介:品牌: KALANG/进口品牌 货号: kl967Po01 抗体名: 载脂蛋白A4(APO
  • 文档:
  • 领域:不详
品牌: KALANG/进口品牌
货号: kl967Po01
抗体名: 载脂蛋白A4(APOA4)多克隆抗体
抗体英文名: Polyclonal Antibody to Apolipoprotein A4 (APOA4)
靶点: 见说明书
浓度: 200ug/ml
应用范围: WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
宿主: Rabbit,兔
适应物种: Sus scrofa; Porcine (Pig)
标记物: 未标记
克隆性:
保存条件: -20oC 至 -80oC
形态: 粉末/液体
亚型: 见说明书
免疫原: 见说明书
规格: 100ug/200ug
多克隆抗体的制备 
www.klbscience.com
多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)是指用含有多个抗原决定簇的抗原免疫动物后刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体,得到的免疫血清含有多种抗体。多克隆抗体可应用于WB、IHC、Elisa、IP等实验中,是生物医学研究领域不可或缺的研究伙伴。下面我们会来介绍一下多克隆抗体的制备过程。
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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