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抗体方法和技术

时间 :2018-12-24 来源:百购生物网

酶联免疫吸附测定(ELISA)
 
ELISA测定基于抗体/抗原结合的原理。它们可以对特定分析物和/或分子相互作用进行定量和表征。
 
针对目标靶标的抗体与报告酶缀合。加入其底物后,酶催化比色分子的产生。使用分光光度计测量该反应的程度,并代表样品中的抗原浓度。
 
每个实验最合适的ELISA形式取决于许多因素,包括所需的灵敏度,特异性和测定时间。与标准ELISA相同的成本,我们的  SimpleStep ELISA™试剂盒可将测定时间减半,而不会影响灵敏度或可靠性。
蛋白质印迹(WB)
Western印迹通常用于确定样品之间的相对蛋白质水平。它们还确定了靶标的分子量,这可以提供对其翻译后加工的深入了解。
 
来自组织/细胞裂解物的蛋白质根据其分子量通过凝胶电泳分离。分离后,将样品转移至膜,其中应用抗体以探测目的蛋白质。
 
明确的指导免疫印迹
印迹故障排除提示HRP检测试剂盒HRP共轭荧光蛋白印迹研讨会
 
免疫组化(IHC)
IHC研究阐明了样品中抗原的组织特异性和亚细胞定位。尽管比蛋白质印迹或ELISA的定量更少,但它们提供了在完整组织的背景下表征蛋白质表达的优点。
 
使用识别靶蛋白和抗体 - 抗原复合物的抗体完成IHC染色,所述抗体 - 抗原复合物通过生色,放射性或荧光底物可视化; 这些可以作为直接的初级偶联物或通过第二抗体引入反应中。
 
样品制备和可视化有多种技术,所用方法应根据所研究的样品类型和所需的灵敏度进行调整。
 
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免疫组织化学网络研讨会IHC方案简介
 
免疫细胞化学(ICC)
ICC用于使用荧光标记的抗体研究蛋白质的亚细胞分布。与IHC相比,该技术提供了更大的空间分辨率,因为培养的细胞缺乏组织样品中发现的复杂的周围环境。
 
将针对目的蛋白质产生的抗体应用于已经固定和透化的细胞培养物样品。通过直接缀合的荧光团或通过荧光团 - 二级缀合物使结合可视化。使用显微镜可以看到结果的信号。可以使用明显标记的一抗一次研究多个靶标。
 
ICC / IF免疫细胞化学和免疫荧光方案
 
流式细胞术和FACS
流式细胞术是一种测量细胞某些化学和物理特性的方法。参数测量包括细胞大小和细胞表面和细胞内标记物的表达。
 
流式细胞术测量标记抗体发出的荧光,其与混合群体中的个体细胞结合。荧光激活细胞分选(FACS)是一种更复杂的系统,其量化荧光信号并将细胞与包含预选特征(即荧光强度,大小和活力)的混合群体分离。
 
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