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多克隆和单克隆抗体的比较

时间 :2018-12-26 来源:百购生物网

多克隆和单克隆抗体的主要差异,优点和缺点。
抗体克隆性通过抗体是来自不同的B细胞(产生多克隆抗体)还是来自来自亲本克隆的相同B细胞(产生单克隆抗体)来确定。然后是重组单克隆抗体,从一组独特的基因体外产生。多克隆和单克隆抗体各有其独特的优点和缺点,使其适用于不同的应用。 
多克隆抗体识别抗原上的多个表位,是稳健的,但具有高的批次间变异性。
单克隆抗体识别抗原上的一个表位并提供高度的再现性。
重组单克隆抗体具有单克隆抗体的优点,具有最低水平的批次间变异性,并且可以通过抗体工程定制其性质。
多克隆抗体
多克隆抗体是来自多个B细胞的免疫应答的抗体的异质混合物,并且每个抗体识别相同抗原上的不同表位。
好处
多克隆抗体有效地扩增来自具有低表达水平的靶蛋白的信号,因为靶蛋白将在其多个表位上结合多于一个抗体分子(这对于定量实验不太有利)。这使得多克隆抗体非常适合检测低浓度的蛋白质。
多克隆抗体比单克隆抗体更能耐受抗原的微小变化(例如多态性,糖基化的异质性或轻微变性)。
与单克隆抗体相比,多克隆抗体在更广泛的pH和缓冲液组合物中更稳定且更稳定。  
多克隆抗体可以鉴定与免疫原蛋白具有高度同源性的蛋白质,并且可以用于筛选除免疫原之外的物种中的靶蛋白(特别适用于观察非模式生物)。
多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的优选选择。
缺点
然而,识别每个抗原的多个表位意味着多克隆抗体是
容易发生批次之间的高度差异。
可能交叉反应并产生非特异性信号。
用于探测抗原上特定结构域的单克隆抗体不太有用。
单克隆抗体
单克隆抗体来自单个B细胞亲本克隆,因此仅识别每个抗原的单个表位。这些B细胞通过与  杂交瘤细胞融合而永生化,允许长期产生相同的单克隆抗体。
好处
单克隆抗体特异性地检测抗原上的特定或限定/限制的表位,使得它们不太可能与其他蛋白质交叉反应。
单克隆抗体具有高度的同质性,这意味着如果实验条件保持不变,单克隆抗体的结果在实验和批次之间可以非常可重复
单克隆抗体更适合需要定量的实验。
缺点
单克隆抗体的表位靶标可能不会在一系列物种中共享,从而限制了它们的灵活性。
单克隆抗体不太适合检测变性蛋白质而不是多克隆抗体或用于需要抗原交联的测定。
单克隆抗体比多克隆抗体更容易通过化学处理抗原而丧失表位(这可以通过将两种或更多种单克隆抗体汇集到相同抗原来抵消), - 表位变化可以极大地影响结合。
单克隆抗体对实验条件(即pH和缓冲液组成)的变化比多克隆抗体更敏感
重组抗体
重组单克隆抗体是从一组独特的基因开发出来的,并结合了单克隆抗体的相同特性
提高了一致性和可重复性
易于扩展
无动物高通量生产