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抗体生产

时间 :2019-01-07 来源:百购生物网

抗体产生依赖于  注射的外来抗原的体内体液反应。外来分子,病毒或细胞的简单免疫可引起强烈的抗体反应,但某些物质不能诱导强烈反应。

 
可以通过修饰抗原或宿主来操纵免疫系统以增加响应。直到最近,这些修改都是根据​​经验发现的,但现在对免疫系统的了解越来越多,因此可以采用更合理的方法。
 
蛋白质,肽,碳水化合物,核酸,脂质和许多其他天然存在的或合成的化合物充当成功的免疫原。肽和非蛋白质抗原通常需要与载体蛋白(牛血清白蛋白或匙孔血蓝蛋白)缀合,以成为良好的免疫原。这是由于它们的小尺寸,并且与载体的缀合提供了所需的II类T受体结合位点。
 
另外,免疫原可能需要与佐剂一起施用以确保高质量/数量的响应。佐剂是免疫应答的非特异性刺激物。它们允许使用较小剂量的抗原来引发持久的抗体反应。
 
 
图1.杂交瘤生产
下载杂交瘤抗体生产图。
 
多克隆生产
通过用抗原免疫制备多克隆抗体。以数周的间隔反复免疫相同的抗原刺激特定的B细胞产生大量的抗原。血液中含有多种抗体,每种抗体都与抗原上的不同表位相对应。免疫血清可以以其粗制形式使用,其中存在高水平的特异性抗体,或者可以通过亲和纯化从血清组分中分离特异性抗体。
 
 
单克隆生产
为了产生单克隆抗体,使用相同的免疫方案并除去所有抗体形成细胞(例如B细胞)。将它们与永生肿瘤细胞融合成为杂交瘤,筛选其抗体产生和性能。
 
产生抗体的杂交瘤被给予克隆名称,其被唯一分配以允许鉴定。通过分离克隆产生抗体的杂交瘤细胞,并使用组织培养物培养。或者,可以将编码抗体产生的基因克隆到转染载体中以产生重组抗体。
 
与多克隆抗体不同,单克隆抗体对一个表位具有确定的特异性。可以收获细胞分泌到培养基中的抗体并以其粗制形式使用,或者可以通过亲和层析纯化。