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抗原是什么以及如何选择抗原来制造抗体

时间 :2019-01-08 来源:百购生物网

任何免疫组织化学技术的基本原理是特异性抗体与其特异性抗原结合/结合以产生排他性抗体 - 抗原复合物。
 
“抗原”的经典定义是当引入易感动物的组织中时引发免疫应答(例如特异性抗体分子的产生)的任何外来物质,并且能够与形成的特异性抗体组合。
 
抗原通常具有高分子量,通常是蛋白质或多糖。多肽,脂质,核酸和许多其他材料也可以起抗原作用。
 
如果这些物质与较大的载体蛋白化学偶联,则也可以针对较小的物质(称为半抗原)产生免疫应答。常见的载体蛋白是牛血清白蛋白(BSA),匙孔血蓝蛋白(KLH)或其他合成基质。
 
多种分子如药物,单糖,氨基酸,小肽,磷脂或甘油三酯可以作为半抗原起作用。因此,给定足够的时间,免疫系统将鉴定任何外来物质并引起特异性抗体产生。
 
然而,这种特异性免疫应答是高度可变的,并且在很大程度上取决于抗原的大小,结构和组成。据说引发强烈免疫反应的抗原具有强免疫原性。
 
为了在抗原和抗体之间发生有效的相互作用,表位(特异性抗体识别和结合的抗原的一部分)必须易于结合。如果靶分子变性,例如通过固定,还原,pH变化或在制备凝胶电泳期间变性,则表位可以改变,这可能影响其与抗体相互作用的能力。
 
例如,一些抗体在蛋白质印迹中无效,但在免疫组织化学方面非常好,因为在后一种方法中,可能在组织中维持复杂的抗原位点,而在前一种方法中,样品制备过程改变蛋白质构象足以破坏抗原位点,从而消除抗体结合。 
 
因此,表位可以存在于抗原的天然细胞环境中,或仅在变性时暴露。在它们的天然形式中,它们可以是细胞质的(可溶的),膜相关的或分泌的。表位的数量,位置和大小取决于在抗体制备过程中呈递多少抗原。
 
如果感兴趣的基因产物以极低浓度存在,则可以选择使用已知的核苷酸序列信息来获得用于产生序列特异性抗体(例如肽特异性抗体)的相应肽。在一些情况下,肽抗原优于全蛋白抗原,因为产生的抗体可以靶向独特的序列区域。当研究属于高序列同源性家族的蛋白质时,这尤其有用。
 
良好抗原的特征包括:
分子内结构稳定性和化学复杂性的区域。
显着的延伸缺乏广泛的重复单位。
尽管在载体蛋白存在下使用分子量低至200Da的半抗原,但最小分子量为8,000-10,000Da。
免疫系统处理的能力。
抗体形成机制可接近的免疫原性区域。
与主机充分不同的结构元素。
对于肽抗原,含有至少30%免疫原性氨基酸的区域:赖氨酸,精氨酸,谷氨酸,天冬氨酸,谷氨酰胺,天冬氨酸。
对于肽抗原,显着亲水或改变残基。