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流式细胞仪的主要光学元件

时间 :2019-01-15 来源:百购生物网

典型安排
流式细胞仪的主要光学元件  这显示了简单仪器的可能布局,其适用于测量与用荧光素,藻红蛋白(PE)和PE-花青素5缀合物标记的抗体孵育的细胞的免疫荧光。
 
光源是通过聚焦透镜的蓝色氩离子激光器。在流动室的远侧是阻挡激光束的杆。前向散射检测器位于阻挡条后面,并检测前向方向上小角度的光散射。聚光透镜与激光束成直角放置。一系列二向色镜(有时称为分束器)选择不同波长的光。
 
 简单流式细胞仪的布局。文中给出了详细说明。
 
 滤光器的特性  。LWP =长传
 
注意,聚光透镜设计用于产生聚焦在无限远处的光(准直光束),使得光电倍增管(PMT)可以放置在距流动室的任何距离处。或者,可以将光聚焦在放置在每个PMT前面的针孔上,以减少收集的不需要的光的量。在这种情况下,PMT必须与流动室等距(就光路而言),需要不同的布局。
 
概述了过滤器的属性  。第一个二向色镜选择波长小于500nm(蓝色)的光。在通过选择蓝光(475-495nm)的屏障滤光器之后,光落在第一PMT(侧向散射,SS)上。第二个二向色选择540nm以下的光,通过绿色屏障滤光片到PMT2上。第三个选择590nm以下的光,通过橙色滤光片到达PMT3,最后剩下的光在通过红色后落在PMT4上过滤。     
 
先进的光学布局
显示了“现有技术”细胞仪的光学布局。该仪器是Dako-Cytomation Mo-Flo,由加州大学戴维斯分校兽医学院配置。它有三个激光器,给出蓝色,红色和紫外线。来自蓝色(氩激光)的光被引导到左侧,在那里测量侧向散射和5个荧光。在右侧,记录来自红色(He-Ne)激光的四种颜色。另一个站测量来自固态紫激光的两个荧光。
 
 
用于测量12种颜色的光学布局 - 一种散射和十一种荧光。经加州大学戴维斯分校Nicole Baumgarth博士许可再现的图片。详细信息在文中给出。